快速即用型 BCA 蛋白定量检测试剂盒,蛋白样品制备在科研中的多维应用领域

2025-07-03

产品名称:快速即用型 BCA 蛋白定量检测试剂盒

产品货号:PR01207

快速即用型 BCA 蛋白定量检测试剂盒是基于BCA(Bicinchoninic Acid,二喹啉甲酸)法开发的蛋白质浓度测定工具,通过优化试剂配方和实验流程,实现 “即开即用”“快速显色” 的检测效果。其原理是利用蛋白质在碱性条件下将 Cu²⁺还原为 Cu⁺,Cu⁺与 BCA 试剂结合形成紫蓝色复合物,在 562 nm 处的吸光度与蛋白质浓度呈线性关系,从而定量样本中的蛋白含量。

产品优势:
1. 打破传统BCA 30min显色时间
5min即可显色;
2. 标品全是即用型;
3. 线性堪比进口某品牌及国产某品牌

快速即用型 BCA 蛋白定量检测试剂盒的多维应用场景

一、分子生物学核心实验质控

1.Western Blot 全流程标准化

上样量精准控制:通过 BCA 定量确保不同样本的蛋白上样量一致(如每孔 20 μg 总蛋白),避免因浓度差异导致的条带强度偏差,提升 WB 结果的可重复性。

抗体孵育优化:根据蛋白浓度调整一抗稀释比例(如已知膜蛋白浓度为 1.5 mg/mL 时,按 1:1000 稀释抗体),减少非特异性结合。

2.qPCR 与蛋白表达关联分析

在基因敲除 / 过表达实验中,同步检测 mRNA(qPCR)与蛋白(BCA 定量后 WB)的表达水平,验证转录与翻译的调控关系(如某基因 mRNA 上调 2 倍,对应蛋白浓度增加 1.8 倍)。

二、细胞生物学研究中的动态监测

1.细胞增殖与毒性评估

药物剂量 - 效应曲线绘制:用不同浓度化疗药物处理细胞后,BCA 测定裂解液总蛋白量,结合 MTT 法计算细胞存活率(如蛋白浓度下降 30% 对应 IC₅₀值)。

细胞周期同步化验证:同步化处理(如血清饥饿)后,检测 G1 期与 S 期细胞的总蛋白增量,评估细胞周期进程(S 期蛋白合成速率较 G1 期高 25%)。

2.外泌体研究的微量蛋白分析

针对超滤法提取的外泌体(蛋白浓度常 < 0.1 mg/mL),快速 BCA 试剂盒的低检测限(1 μg/mL)可准确量化其蛋白含量,为外泌体标志物(如 CD63)的 WB 检测提供上样依据。

三、蛋白质组学与功能研究

1.质谱(MS)前处理定量

在 Label-free 定量蛋白质组学中,BCA 测定样本浓度后按比例混合(如 3 组样本各取 50 μg 蛋白),确保质谱检测的初始上样量一致,降低后续数据分析的系统误差。

2.酶活性与蛋白浓度关联实验

纯化的酶蛋白(如激酶)经 BCA 定量后,可标准化酶活性测定体系(如 10 μg 酶蛋白加入反应体系,计算每分钟底物转化量),排除蛋白浓度差异对酶活结果的干扰。

四、神经科学与病理机制研究

1.脑组织匀浆的蛋白定量

阿尔茨海默病模型小鼠的脑组织裂解液中,BCA 定量后检测 Aβ 蛋白(需先经超速离心分离),结合总蛋白浓度计算 Aβ 的相对含量(如病变组 Aβ/ 总蛋白比值较对照组高 40%)。

2.脊髓损伤后的蛋白表达变化

损伤区组织提取总蛋白后,BCA 定量用于后续炎症因子(如 TNF-α)的 ELISA 检测,通过标准化蛋白浓度消除不同样本间组织量差异的影响(如每 mg 总蛋白中 TNF-α 含量)。

五、植物与农业科学应用

1.作物胁迫响应蛋白分析

干旱处理后的叶片组织裂解液经 BCA 定量,用于抗氧化酶(如 SOD)的活性测定,以单位蛋白量的酶活性(U/mg)比较不同品种的耐旱性(耐旱品种 SOD 活性为 25 U/mg,敏感品种为 12 U/mg)。

2.植物次生代谢物研究

提取种子贮藏蛋白(如大豆球蛋白)后,BCA 定量结合 SDS-PAGE 分析蛋白亚基组成,为品质育种提供数据支持(如高蛋白品种总蛋白浓度达 8 mg/mL)。

六、科研教学与高通量筛选

1.本科生实验教学

简化版快速 BCA 实验(室温 20 分钟显色)适合 4 课时实验课,学生可在一堂课内完成从细胞裂解到蛋白定量的全流程,直观理解 “蛋白浓度 - 吸光度” 的线性关系。

2.药物靶点高通量筛选

构建 96 孔板筛选体系:每孔加入 20 μL 不同化合物 + 30 μL 靶蛋白溶液(经 BCA 调至统一浓度 1 mg/mL),通过酶活检测快速筛选抑制剂(如某化合物使酶活性下降 70%)。

本文引用地址:https://www.med-life.cn/product/1296423.html

联系方式:4006087598

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