QuicKey Pro-小鼠免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫吸附测定试剂盒

QuicKey Pro Mouse IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit (订货以CAS编码或英文名称为准)

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编号:E-OSEL-M0005
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E-OSEL-M0005-96T Elabscience 96T
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英文名称: QuicKey Pro Mouse IgG(Immunoglobulin G) ELISA Kit
详细描述

QuicKey Pro系列

与传统ELISA试剂盒相比,将实验时间缩短了至少1-2小时,同时提高了试剂盒的灵敏度,让客户可以获得更加精确的实验结果。该系列是Elabscience自主开发的新技术,旨在帮助客户以更为高效的方式进行科学研究。

用途

该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组IgG浓度。

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠 IgG抗体包被于酶标板上,实验时加入样品(或标准品)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗IgG检测抗体,样本(或标准品中)的IgG与包被抗体IgG及HRP标记的抗IgG抗体结合,形成包被抗体-IgG-HRP标记的抗IgG抗体的复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值,IgG浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IgG的浓度。

反应类型 双抗体夹心法
规格 96T
反应时间 1.5h
反应性 小鼠
检测方法 Colormetric
检测范围 1.56-100 ng/mL
灵敏度 0.51 ng/mL
样本体积 50μL
样本类型 血清、血浆或其他相关生物液体

特异性

可检测样本中的小鼠IgG,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

重复性

板内,板间变异系数均<10%。

典型数据

由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

(ng/mL)O.DAverage
100 2.596
2.608
2.602
50 1.732
1.746
1.739
25 1.046
1.036
1.041
12.5 0.508
0.542
0.525
6.25 0.25
0.224
0.237
3.13 0.185
0.161
0.173
1.56 0.12
0.128
0.124
0 0.056
0.058
0.057
 

精密度

板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

 Intra-assay PrecisionInter-assay Precision
Sample 1 2 3 1 2 3
n 20 20 20 20 20 20
Mean
(ng/mL)
5.07 8.36 48.61 5.40 9.15 48.67
Standard
deviation
0.29 0.44 2.38 0.35 0.46 1.65
C V (%) 5.77 5.28 4.90 6.46 5.03 3.38

回收率

分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

Sample TypeRange (%)Average Recovery (%)
Serum (n=8) 86-101 93
EDTA plasma (n=8) 92-107 99

线性

分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

  Serum (n=5)EDTA plasma (n=5)
1:2 Range (%) 86-101 98-111
Average (%) 93 103
1:4 Range (%) 84-97 93-107
Average (%) 91 99
1:8 Range (%) 88-102 99-114
Average (%) 94 105
1:16 Range (%) 84-96 94-106
Average (%) 90 99

试剂盒组成及保存

未拆封的试剂盒可在2-8℃保存6个月;试剂盒组分开封后请按照下表中的条件分别保存。

中文名称英文名称规格保存条件
ELISA 酶标板 Micro ELISA Plate (Dismountable) 96T:8 孔×12 条
48T:8 孔×6 条
24T:8 孔×3 条
96T*5:5 块 96T酶标板
2-8℃, 可存放1个月
冻干标准品 Reference Standard 96T:2 支
48T/24T:1 支
96T*5:10 支
2-8℃, 复溶后当天使用
浓缩HRP酶结合抗体 (100×) Concentrated HRP Linked Detection Ab(100×) 96T:1支 60μL
48T/24T:1支 30μL
96T*5:5 支 60μL
2-8℃(避光)
标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 96T/48T/24T:1瓶 10mL
96T*5:5瓶 10mL
2-8℃
HRP酶结合抗体稀释液 HRP Linked Ab Diluent 96T/48T/24T:1瓶 7mL
96T*5:5瓶 7mL
浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer(25×) 96T/48T/24T:1瓶 30mL
96T*5:5瓶 30mL
底物溶液(TMB) Substrate Reagent 96T/48T/24T:1瓶 10mL
96T*5:5瓶 10mL
2-8℃(避光)
反应终止液 Stop Solution 96T/48T/24T:1瓶 10mL
96T*5:5瓶 10mL
2-8℃
封板覆膜 Plate Sealer 96T/48T/24T:5张
96T*5:25张
 
产品说明书 Product Description 1 份
质检报告 Certificate of Analysis 1 份

说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

试验所需自备物品

  • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
  • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
  • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
  • 4.吸水纸

操作步骤

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